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pcr荧光探针法什么意思?
在紫外-可见-近红外区有特征荧光,并且其 荧光性质(激发和发射波长、 强度、寿命、 偏振等)可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子。
taqman荧光探针的特点?
Taqman探针是一种双标记的水解探针。TaqMan荧光探针是一种寡核苷酸探针,其5’末端携带荧光基团,如FAM、TET、VIC、HEX等,3’端携带淬灭基团,如TAMRA、BHQ等。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。TaqMan方法优点是特异性高,重复性好,但价格高,只适合特定目标。TaqMan探针法荧光定量PCR适用于病原体检测,疾病耐药基因研究,药物疗效考核,遗传疾病的诊断。新型的TaqMan-MGB探针还用于分析基因突变(SNP),有望成为基因诊断和个体化用药分析的首选技术平台。
pe染料是什么光?
pe燃料是藻红蛋白,是从红藻中分离纯化的,能发出强烈的荧光,具有很好的吸光性能和很高的量子产率,在可见光谱区有很宽的激发及发射范围。用常规的标记方法可以很方便地将其与生物素、亲和素和各种单**抗体结合起来制成荧光探针,用于荧光显微检测、荧光免疫测定、双色或多色荧光分析、癌细胞表面抗原检测、流式细胞荧光测定等抗体荧光标记以及**成像应用等诊断及生物工程技术。
荧光pcr检测的是什么?
PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;刚开始时, 探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时,Taq酶的5'端-3'端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。或者使用荧光染料SYBR。
pi染色剂的浓度?
PI不能穿透细胞膜而被排斥在活细胞外,但是可以穿过破损的细胞膜而对核染色。利用这一特性,通常与Calcein-AM、Hoechst 33258或 Hoechst 33342等活细胞荧光探针一起使用,同时对活细胞和死细胞染色和鉴定,用于细胞凋亡相关的研究。也可以用作多重荧光染色的复染剂,兼容于各种细胞标记技术,包括直接或者间接的荧光抗体检测,mRNA原位杂交,细胞结构特异性的荧光探针检测法以及组织染色。PI的单独染色也可以进行细胞周期的检测。 本品是溶于水的PI 储存液,浓度为1mg/mL,只需用合适的缓冲液稀释到工作液即可。
荧光定量PCR技术有哪些优点呢?
荧光定量PCR与普通PCR相比具有以下优点:1、高灵敏性 可检测单个细胞基因;2、高特异性和精确性 将DNA杂交的高特异性和光谱技术的高精准性融合,应用荧光探针和光电传导,直接探测基因扩增过程中荧光信号的变化,以获得定量结果,相当于在PCR反应过程中自动完成了Northern杂交;3、操作简便、速度快 通过计算机和分析软件实现PCR扩增、产物检测和定量分析一体化;4、安全、无污染 FQ-PCR在全封闭状态下进行PCR扩增和产物分析,杜绝了传统PCR开放检测对环境的污染和由此导致的假阳性;5、结果观测重复性好 一起在线实时观测,结果判断直观,避免人为因素干扰。