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血涂片的血涂片-染色结果
在正常情况下血膜外观为粉红色,在显微镜下红细胞呈肉红色;白细胞胞浆能显示各种细胞的特有色彩,细胞核染紫红色,染色质清楚,粗细松紧可辨。染色结果偏酸,则红细胞和嗜酸性粒细胞颗粒偏红,白细胞核呈浅蓝色或不着色;染色结果偏碱,则所有细胞染成灰蓝色,颗粒深暗,嗜酸性颗粒可染成暗褐色,甚至紫黑色或蓝色。嗜中性颗粒偏粗,偏碱(紫黑色).血片原处呈绿色.提问添加摘要
瑞氏吉姆萨染色原理
染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。
PH对细胞染色有一些影响。细胞里各种成分均不蛋白质,因为蛋白质系两性电解质,带电荷随溶液PH而定,在偏酸性环境里正电荷增多,易和伊红结合,染色为偏红;在偏碱性环境里负电荷增多,易和美蓝或天青结合,染色偏蓝。
所以细胞染色对氢离子浓度十分敏感,染色用正经片一定清洁,要无酸碱污染。配制顼特液一定用优质甲醇,稀释染色一定用缓冲液,冲洗一定用水应近中性,不然可导致各种细胞染色反应异常,以致于识别困难,甚至造成错误的。
扩展资料
常用的细胞染色方法有:
1、简单染色法,常用碱性染料如美蓝等进行简单染色;
2、革兰氏染色法,主要包括结晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或**)脱色以及番红复染四个过程;
3、瑞氏染色法,瑞氏染料溶剂主要是由伊红美蓝组成;
4、吉姆萨染色法,吉姆萨染色原理与结果和瑞特染色法基本相同;
5、细胞免疫荧光染色法,免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合。
染色细胞固定有物理法与化学法,物理法为干燥和火焰固定,化学法最常用的是甲醛、乙醇、**和醋酸等。
1、偶氮偶联法:利用人工合成的酶底物,在酶作用下,产生分解产物,再与重氮盐结合引起偶氮偶联,使其形成不溶性的偶氮色素,以此证明酶的存在。
2、联苯胺法:粒细胞和单核细胞中的过**物酶作用于过**氢,释放新生态氧,使无色的联苯胺形成蓝色沉淀。
3、普鲁士蓝法:细胞内、外铁与酸性亚铁氰化钾作用,形成蓝色亚铁氰化铁沉淀。
参考资料来源:百度百科-吉姆萨染色
常用的染色方法 瑞士染色的药品 方法 过程
瑞士染液由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝溶解于甲醇而成.不同的细胞由于所含化学成分不一样,对各种染料的亲和力也不一样,因此,①细胞中的碱性物质,如红细胞中的血红蛋白及嗜酸性粒细胞的嗜酸性颗粒等与酸性染料伊红结合染成红色,这种碱性物质物质又称为嗜酸性物质.②细胞中的酸性物质,如淋巴细胞及嗜碱性粒细胞的碱性颗粒等与碱性染料亚甲蓝结合染成蓝色,这些酸性物质成为嗜碱性物质.③中性粒细胞的中性颗粒呈等点状态与伊红和美蓝均可结合,染成淡紫红色,成为嗜中性物质.
瑞士染色步骤:1)标记血涂片2)加瑞士染液:待血涂片干透后,用蜡笔在两端画线,以防染色时染液外溢.然后将血涂片平放于染色架上,滴加染液3~5滴.3)加缓冲液:约1min后,滴加等量或稍多的缓冲液,轻轻摇动血涂片或用洗耳球对准血涂片加液处轻吹,使染液充分混合.4)冲洗染液:染色5~10min后,用流动的蒸馏水从血涂片一端冲去染液,约30s以上.染片背面用纱布擦净后,待干.5)判断染色结果:在正常情况下,良好的染色结果血膜外观为淡紫红色;低倍镜下,细胞分布均匀;红细胞呈粉红色,少见染色颗粒,血细胞无人为形态如空泡.白细胞胞质能显示各类细胞的特有色彩,白细胞核染成紫红色,染色质和副染色质清晰,粗细松紧可辨.
注意事项:1)血涂片先要做好标记.2)必须待血涂片干透后才加染液.3)要注意染液与缓冲液的比例.4)加缓冲液后,要使其与染液充分混匀.5)染色时,血涂片正反要分清楚.6)冲洗时要用流动的水从玻片一端冲.7)染色过程中要把握好时间.8)染液不可过少,以防蒸发干燥染料沉着于血片上难冲洗干净.9) 染色时应注意保护血膜尾部细胞,不能划掉.因为体积较大细胞常在此处出现.
瑞士染色主要适用于观察细胞形态的血涂片的染色.
瑞氏染色血涂片的步骤
静脉采血后使用玻璃棒、毛细管、注射针头等在距载玻片一端1cm处加1滴抗凝血,左手平执载玻片,或放在类似桌子等平坦地方,右手持推片从前方接近血滴,使血液沿推片边缘展开成适当的宽度,立即将推片与载玻片呈 30~45°角,轻压推片边缘将血液推制成厚薄适宜的血涂片。
染色用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线,防止染液外溢。再将瑞氏染液滴在血膜上,至染液淹没全部血膜,染1分钟。加等量蒸馏水(或缓冲液)与染液混合再染5分钟。最后用蒸馏水把染液冲掉,用吸水纸吸干,自然干燥后即可观察。
扩展资料:
注意事项:
1、血涂片干透后固定,否则细胞在染色过程中容易脱落。
2、冲洗时应以流水冲洗,不能先倒掉染液,防染料沉着在血涂片上。冲洗时间不能过久,以防脱色。如血涂片上有染料颗粒沉积,可滴加甲醇,然后立即用流水冲洗。
3、染色过淡可以复染,复染时应先加缓冲液,然后加染液。染色过深可用流水冲洗或浸泡,也可用甲醇脱色。
4、瑞氏染色Ⅰ液由瑞氏染料、甲醇(AR级以上)和**组成,Ⅱ液为磷酸盐缓冲液(pH6.4~pH6.8)。
参考资料来源:百度百科-血涂片染色
显微镜用的载玻片玻璃对成分有严格的要求么?
没有,国产的载玻片很垃圾,但是能用
疟疾血涂片用什么染液
瑞氏染液或姬氏染液都可以
制作蛙血涂片的具体步骤?
一、实验原理将一小滴血液均匀涂在玻片上,呈单层分布,制成薄血片。用瑞氏染液进行染色。细胞中的碱性物质,如RBC中的血红蛋白及嗜酸性粒细胞嗜酸性颗粒等与酸性染料伊红结合染成红色;细胞中的酸性物质,如淋巴细胞胞质及嗜碱性粒细胞质中的嗜碱性颗粒等与碱性染料亚甲蓝结合染成蓝色;中性粒细胞的中性颗粒呈等电状态与伊红和亚甲蓝均可结合,染成淡紫红色。二、操作过程血涂片制备可分5个步骤进行: 消毒取血推片染色观察。
1、采血 静脉采血后,使用玻璃棒、毛细管、注射针头等在距载玻片一端1cm处加1滴抗凝血。 2、推片 左手平执载玻片,或放在类似桌子等平坦地方,右手持推片从前方接近血滴,使血液沿推片边缘展开成适当的宽度,立即将推片与载玻片呈 30-45°角,轻压推片边缘将血液推制成厚薄适宜的血涂片,血涂片应呈舌状,头、体、尾清晰可见。 3、干燥将推好的血涂片在空气中晃动,使其迅速干燥。天气寒冷或潮湿时,应于37温箱中保温促干,以免细胞变形缩小。 4、标记在载玻片的一端用记号笔编号。 5、染色用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线,防止染液外溢。再将瑞氏染液滴在血膜上,至染液淹没全部血膜,染1分钟。加等量蒸馏水(或缓冲液)与染液混合再染5分钟。最后用蒸馏水把染液冲掉,用吸水纸吸干,自然干燥后,即可观察。6、用显微镜观察三、血涂片染色1、瑞氏染料法瑞氏染料是由碱性染料美蓝和酸性染料**伊红合称伊红美蓝染料即瑞氏 (美蓝-伊红Y)染料。伊红钠盐的有色部分为*离子,无色部分为阳离子,其有色部分为酸性,故称伊红为酸性染料。美蓝通常为氯盐是碱性的,美蓝的中间产物结晶为三氯化镁复盐,其有色部分为阳离子,无色部分为*离子,恰与伊红钠盐相反。瑞氏-吉姆萨混合染色能集合瑞氏染色与吉姆萨染色的优点。 2、染色方法标记血涂片,将血涂片平放在染色架上,滴加A液覆盖整个血膜,30秒-1分钟后,滴加B液,将A、B液混匀,可用洗耳球轻吹液面,A、B液的比例为1:2,静置水平位置染色5-10分钟后,将载玻片拿起,轻轻晃动,使染料不再附着于血膜上。把水流调至最小,平持载玻片,与水流方向呈90度,在血膜头部冲入,向血膜的尾端调整玻片的角度,直至染料冲干净,冲洗干净后的血涂片,放置在血片架上将水自然控干,或倾斜玻片等待自然干燥。3、判断染色结果在正常情况下,良好的染色结果为血膜外观为淡紫红色;低倍镜下,细胞分布均匀;细胞呈粉红色,少见染色颗粒,白细胞胞质能显示各类细胞的特有色彩,白细胞核染成紫红色。另外,载玻片也有一定的要求:制备血涂片使用的载玻片要有很好的清洁度。新的载玻片常有游离碱质,应用清洗液或10% **浸泡24小时,然后再彻底清洗。用过的载玻片可放入适量肥皂水或洗涤剂的水中煮沸20分钟,再用热水将肥皂和血膜洗去,用自来水反复冲洗,然后擦干备用。